伏安酶聯(lián)免疫分析法在其他方面的應(yīng)用
乙型肝炎病毒抗原抗體的測(cè)定，病毒性肝炎主要包括甲型(HAV)乙性(HBV)和非甲非乙型三種，其中以乙型肝炎的危害性zui大。這是因?yàn)闄C(jī)體在感染了乙型肝炎病毒后，除急性表現(xiàn)外，尚有相當(dāng)一部分轉(zhuǎn)化為慢性肝炎、無(wú)癥狀帶病毒者，其中一部分會(huì)將發(fā)展為肝硬化，甚至肝癌，導(dǎo)致死亡。因此對(duì)乙型肝炎的防治和尋找早期靈敏的診斷方法將很受關(guān)注。目前常用的分析方法有放射免疫分析法和ELISA法等。兩個(gè)伏安酶聯(lián)免疫分析體系應(yīng)用于人血清中乙型肝炎病毒多種抗原抗體的電化學(xué)測(cè)定，取得了令人滿意的結(jié)果。
(1) ODA-H2O2-HRP伏安酶聯(lián)免疫分析體系，采用雙抗體夾心法測(cè)定乙型肝炎表面抗原(HBsAg)測(cè)得線性范圍為1:1~1:384，檢測(cè)限為1:384，靈敏度是ELISA分光光度法的16倍。
采用雙抗原夾心法測(cè)定乙型肝炎表面抗體(HBsAb),測(cè)得線性范圍為1:1~1:256，檢測(cè)限為1:256，靈敏度是ELISA分光光度法的2倍。
乙型肝炎核心抗體(HBcAb)測(cè)定是采用異相競(jìng)爭(zhēng)法進(jìn)行的，測(cè)定得到的線性范圍是1:1~1:512，檢測(cè)限為1:512，靈敏度是ELISA分光光度法的2倍。
乙型肝炎E抗原(HBeAg)的測(cè)定方法同HBsAb。測(cè)定得到的線性范圍是1:1~1:1024，檢測(cè)限為1:1024，靈敏度可達(dá)ELISA分光光度法的16倍。
乙型肝炎E抗體(HBeAb)的測(cè)定是乙型肝炎診斷的一項(xiàng)重要指標(biāo)，采用競(jìng)爭(zhēng)性抑制免疫反應(yīng)對(duì)其進(jìn)行測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果，測(cè)得線性范圍為1:1~1:384，檢測(cè)限為1:384，靈敏度是ELISA分光光度法的,4倍。
同時(shí)，以ODA-H2O2-HRP伏安酶聯(lián)免疫分析體系對(duì)10份人血清樣品進(jìn)行了測(cè)定，測(cè)定結(jié)果與ELISA分光光度法進(jìn)行對(duì)照，結(jié)果*一致，兩者具有很好的相關(guān)性。
(2) OT-H2 O2-HRP伏安酶聯(lián)免疫分析體系,乙型肝炎病毒5種抗原抗體的測(cè)定方法同ODA-H2O2-HRP體系，按照實(shí)驗(yàn)方法對(duì)HBsAg、HBsAb 、HBcAb、HBeAg和 HBeAb進(jìn)行測(cè)定，所得的線性范圍分別為 1:1~1:512、1:1:~1:1024、1:1~1:1024、1:1~1:1024和1:1~1:1536，對(duì)應(yīng)的檢測(cè)限分別為1:512、1:1024、1:1024、1:1024和1:1536，靈敏度分別是ELISA分光光度法的16倍、8倍、2倍、16倍和16倍。對(duì)人血清樣品分析的結(jié)果也與ODA-H2O2-HRP體系所測(cè)得結(jié)果*一致。
人血清鐵蛋白的測(cè)定
人血清鐵蛋白的測(cè)定(Ferritin)為一儲(chǔ)存及利用鐵的蛋白質(zhì)，主要儲(chǔ)存于網(wǎng)狀肉皮系統(tǒng)及骨髓中。人鐵蛋白微量存在于血清中，但血清鐵蛋白濃度的水平及其變化可以反映體內(nèi)的鐵儲(chǔ)備，鐵蛋白的測(cè)定是缺鐵性貧血及肝癌的一項(xiàng)重要指標(biāo)。因而較廣泛地用于臨床某些血液疾病的診斷及鑒別診斷。目前臨床檢測(cè)中測(cè)定鐵蛋白的常用方法有間接血凝試驗(yàn)、雙擴(kuò)散及ELISA等方法。OAP-H2O2-HRP、MAP-H2O2-HRP、PAP-H2O2-HRP等伏安酶聯(lián)免疫分析測(cè)定人血清中鐵蛋白的新方法。該方法以線性掃描二階導(dǎo)數(shù)伏安法檢測(cè)HRP催化H2O2氧化電化學(xué)底物的產(chǎn)物，采用雙抗體夾心免疫分析法對(duì)鐵蛋白進(jìn)行測(cè)定，靈敏度高于經(jīng)典的ELISA分光光度法。三個(gè)體系對(duì)鐵蛋白測(cè)定的線性范圍分別為0.2~320ng/ML、0.25~320 ng/ML、和0.2~320 ng/ML。用所建立的方法對(duì)人血清樣品進(jìn)行測(cè)定，并與現(xiàn)行的ELISA分光光度法進(jìn)行對(duì)照，二者相關(guān)性好。
